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Les examens biologiques Chapitre 8 I) Les examens de sang
1) Numération Formule Plaquette
= NFP = Hémogramme : détermination du nombre des éléments figurés du sang
par mL de sang. Cet examen est réalisé en 1ère intention en infectieux. Il permet la
recherche de leucocyte ; toute la lignée des GB y est détaillée.
Il permet l'orientation du diagnostic. Modalités d'examen :
. A jeun si possible.
. Sur tube violet (avec anticoagulant).
. 5 mL suffit.
. Prélèvement veineux. Résultats normaux :
. GR : 4 millions / mL.
. GB : 6.000 à 10.000 / mL.
. Plaquettes : 150.000 à 400.000 / mL.
. Hémoglobine : 12 à 16 g / 100 mL.
. Hématocrite : 35 à 45%.
. Neutrophiles : 45 à 70%.
. Basophiles : < 1%.
. Eosinophiles : 1 à 5%.
. Lymphocytes : 20 à 30%.
. Monocytes : 2 à 8%.
Pathologies :
Anémie v Inflammation ^ Virose v
Infection bactérienne ^ Parasitose et virose v Parasitose ^
Pathologie virale ^ VIH ou tuberculose v 2) Les marqueurs de l'inflammation
VS : vitesse à laquelle les hématies se sédimentent dans un tube vertical
calibré et dans un temps donné. La vitesse de sédimentation correspond à la
hauteur en mm de la couche de plasma. Modalités d'examen :
. A jeun si possible.
. Sur tube sec.
. Prélèvement veineux. Résultats normaux :
< 10 mm au bout d'1h.
Pathologies :
Infection bactérienne ^
Infection virale ^ ou ? CRP : protéines appartenant au ?-globuline, et synthétisées par le foie.
Elle apparaît précocement dans les phénomènes inflammatoires. Modalités d'examen :
. A jeun si possible.
. Sur tube sec.
. Prélèvement veineux. Résultats normaux :
< 6 mg / L.
Pathologies :
Orientation bactérienne > 20 mg / L
Virose ^ faible.
3) Frottis sanguin et goutte épaisse
Ce sont des examens qui consistent à mettre en évidence un agent infectieux
par examen direct au microscope d'un échantillon de sang. Frottis sanguin : utilisé pour faire le diagnostic de paludisme : il met en
évidence la présence de plasmodium et compte le % d'hématies parasitées. Modalités d'examen :
. Pendant le pic fébrile.
. Avant un ttt anti-paludéen.
. Sur tube violet (avec anticoagulant) de 5 mL.
. Envoyé directement au labo. Goutte épaisse : il permet de mettre en évidence le plasmodium par une
goutte de sang étalée sur une lame.
4) Les sérodiagnostics
C'est une sérologie qui permet la recherche des anticorps ou
immunoglobulines spécifiques après une agression par un antigène. Elle
permet de vérifier l'immunité et de faire le diagnostic d'une infection.
En début d'infection, ce sont surtout les immunoglobulines qui sont
recherchés, les anticorps étant trop peu nombreux. Modalités d'examen :
. 5 mL de sang sur tube rouge (sec).
. Pas besoin d'être à jeun.
5) Les hémocultures
C'est un examen sur PM qui consiste à effectuer un prélèvement aseptique de
sang veineux, dans le but d'isoler et d'identifier un germe dans le sang,
après mise en culture, et de réaliser un antibiogramme. Le sang prélevé permet d'ensemencer un milieu de culture aérobique et un
milieu anaérobique.
Il existe des milieux d'ensemencement spécifiques notamment pour la
recherche de champignons. Principe :
. L'examen est réalisé le plus tôt possible, avant tout ttt.
1. Lors des pics thermiques > 38,5°C.
2. En cas d'hypothermie < 35°C.
3. Lors des frissons correspondant à une décharge microbienne.
4. Après un ttt ATB, dans ce cas noter la posologie et l'heure de
prise.
. Le nombre et le rythme des prélèvements dépendent de l'état clinique
du patient :
1. 2 prélèvements espacés d'1/2h en cas de ttt anti-infectieux
urgent.
2. 3 prélèvements espacés d'1h en cas de fièvre continue.
3. 1 prélèvement à chaque pic fébrile en cas de fièvre
discontinue.
4. 48h après l'arrêt du ttt ATB pour vérifier l'efficacité.
. La ponction veineuse directe est la méthode de référence, car le
prélèvement sur cathéter ou chambre implantable augmente le risque de
contamination.
. Le prélèvement est fait en 1er, avant tout autre prélèvement sanguin. Technique :
. Désinfecter un chariot ainsi que l'extérieur des flacons
(antiseptique, eau stérile).
. Procéder à un lavage hygiénique des mains.
. Déposer à l'étage supérieur du chariot :
o 4 étiquettes d'identification du malade par prélèvement.
o Le bon de demande d'examen.
o Le sac labo pour le prélèvement.
o Des tampons stériles.
o Des gants à usage unique.
o 1 flacon de Bétadine * rouge et jaune.
o 1 flacon d'eau stérile.
o 1 masque si nécessaire.
o Des essuie-mains.
o 1 garrot propre.
o 1 tondeuse si le patient a une pilosité importante.
o 1 flacon d'hémoculture.
o 2 dispositifs de ponctions veineuses spécifiques (1 de
sécurité).
o 1 corps de vacutainer à usage unique spécifique.
o 1 conteneur à aiguilles.
o 1 rouleau de sparadrap.
o 1 protection en papier bleu imperméable (1 champ stérile).
o 1 thermomètre.
o 1 sac poubelle et son support.
. Vérifier la limpidité et la date de péremption des flacons.
. Oter les capuchons protecteurs et désinfecter les bouchons avec une
compresse de Bétadine * dermique, et laisser la compresse sur le
flacon.
. Vérifier l'intégrité des emballages et date de péremption des
dispositifs de ponction.
. Prendre la température du patient et la noter.
. Fermer la fenêtre et faire sortir les visiteurs.
. Procéder à un lavage hygiénique des mains.
. Mettre la protection hygiénique sous le bras.
. Poser le garrot, repérer la veine à ponctionner et retirer le garrot.
. Procéder à une dépilation si nécessaire.
. Dévisser et retirer les bouchons des flacons.
. Préparer les compresses : 2 de savon antiseptique, 2 d'eau et 2
d'an,tiseptique.
. Refermer les flacons.
. Mettre le masque si nécessaire.
. Ouvrir le reste du matériel.
. Procéder à un lavage des mains antiseptique.
. Adapter le corps du vacutainer au dispositif de ponction veineuse.
. Réaliser l'asepsie cutanée (du côté opposé à la perfusion) en partant
du site ponction vers l'extérieur : Bétadine * rouge, eau stérile,
séchage, Bétadine * jaune.
. Laisser sécher 1 min.
. Serrer le garrot.
. Mettre les gants.
. Appliquer une 2ème couche d'antiseptique.
. Ponctionner la veine.
. Lorsque le sang apparaît en début de tubulure, piquer l'autre
extrémité du dispositif dans le flacon d'hémoculture jusqu'au niveau
indiqué.
. Desserrer le garrot.
. Désadapter le dispositif du flacon.
. Enlever l'aiguille et comprimer le point de ponction avec une
compresse et fixer du sparadrap.
. Neutraliser l'aiguille avec le système de sécurité avant de l'éliminer
dans le collecteur.
. Retourner le flacon d'hémoculture 2 ou 3 « allers retours ».
. Retirer la protection et le garrot.
. Retirer les gants et éliminer les déchets.
. Ne pas omettre l'identification du patient sur le flacon.
. Remplir la fiche de demande d'examen : température, pathologie, ATB et
ttt.
. Acheminer rapidement au laboratoire de bactériologie ou conserver à
37°C dans une étuve. NB : en cas de recherche de brucellose, l'indiquer clairement sur la fiche
de demande d'examen ; le milieu est identique, mais le traitement du flacon
en labo est différent. Résultats :
. Un délai de 24 à 48h est nécessaire pour la levée des colonies
microbiennes.
. Pour certains germes, il faut attendre 1 à 2 semaines.
. Il existe des germes de contamination rendant le prélèvement
ininterprétable.
6) Dosage des ATB
Il permet de vérifier et éventuellement d'adapter la posologie de l'ATB
utilisé. Principe :
. 1er prélèvement sanguin sur tube sec (5 à 10 mL), avant administration
du ttt.
. 2ème prélèvement sanguin sur tube sec (5 à 10 mL), 30 min ou 1h après.
. Grouper les prélèvements avec la fiche de renseignement. II) Les examens d'urine
1) Bandelette urinaire
Elle permet d'orienter le diagnostic e cas de syndrome atypique. Modalités d'examen :
. Urine fraîchement émise < 2h.
. Vérifier la date de péremption de la bandelette.
. Plonger la bandelette et respecter le temps de lecture.
. Bien regarder les leucocytes et nitrites.
2) Cytochimie bactériologique des urines = ECBU
C'est un examen du sédiment urinaire obtenu par centrifugation des urines,
pour y étudier les éléments figurés (cristaux, protéines ...). Souvent, un
antibiogramme y est associé. Modalités d'examen :
. Premières urines du matin.
. 1er jet d'urine éliminé.
. Utilisation d'un poudrier stérile.
. Avant tout ttt ATB.
. Après toilette du méat urinaire.
. Utilisation de collecteur stérile pour les enfants. III) Examens des selles
1) Coproculture
C'est une étude microscopique des selles, dans le but d'identifier les
germes présents. Modalités d'examen :
. Selles fraîches.
. Poudrier stérile ou propre.
2) Parasitologie des selles
C'est une recherche de parasites intestinaux. Modalités d'examen :
. Selles fraîches.
. 3 examens de suite sur quelques jours.
. Régime sans fibre 3j avant.
. Eviter les médicaments non résorbables avant (paraffine ...).
. Envoyer la totalité des selles ter le temps de lecture. IV) Prélèvements par site
1) Examen