TP 6 de bactériologie

Il est bien et il y a plein de QCM pour s'entraîner ( si on veut) ... 2 Quelles sont les
examens bactériologiques (prélèvements) que vous allez prescrire qui vont ...

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TP 6 de bactériologie
Semaine du 19/11 au 23/11
DR Catherine BRANER et Annie FELTEN
Ronéotypeur : EMERY MALO
Rôle du laboratoire de bactériologie dans l'orientation de
l'antibiothérapie PLAN : CORRECTION DE L'INTERRO ECRITE : -Tuberculose (sujet 1& 2)
- Flore vaginale (sujet 1)
- Flore vaginale (sujet 2)
ASSOCIATION D'ANTIBIOTIQUES : - Synergie
- Antagonisme
- Indifférence
- Dans quel cas donner une association d'antibiotiques ?
SPECTRES CLINIQUES : - Rappel
- Spectre d'activité RESISTANCE AUX ANTIBIOTIQUES DU STAPHYLOCOQUE DORE : -Aux B-lactamines
-Aux autres familles d'antibiotiques RESISTANCE DES ENTEROBACTERIES :
Allez voir le site www.microbes-edu.org
Il est bien et il y a plein de QCM pour s'entraîner ( si on veut)
CORRECTION DE L'INTERRO ECRITE : Comme ce TP est le dernier TP de bactério de l'année la correction de
l'interro de début de cours ne sera pas faite par la suite , donc je la
mes dans la ronéo : ça peut vous servir à vous entraîner : sujet 1 TUBERCULOSE (les 2 sujets sont équivalents dixit la prof)
Homme de 90 ans, hospitalisé pour fièvre depuis 3 semaines à recrudescence
nocturne accompagné d'une altération de l'état général. Les radios du
thorax sont en faveur d'une tuberculose pulmonaire. 1 Quelles sont les espèces bactériennes pouvant être responsable de la
tuberculose chez ce patient ?
-mycobactérium tuberculosis (principalement)
-mycobactérium africanum (++ si patient africain)
-mycobactérium bovis (rare) 2 Quelles sont les examens bactériologiques (prélèvements) que vous allez
prescrire qui vont vous permettre d'étayer le diagnostic de tuberculose
chez ce patient ?
-Examen CytoBactériologique des Crachats (3 fois de suite le matin a jeun)
-Tubage gastrique (pour les personnes qui ne crachent pas)
-Et si les prélèvements ne sont pas positif on peut faire des fibroscopies
(fibroaspiration bronchique ou encore le LBA (lavage broncho alvéolaire) 3 Comment va procéder le laboratoire de bactériologie pour mettre en
évidence l'agent étiologique ?
- Examen microscopique (frottis et coloration de Ziehl-neelsen)
- Ensemencement en milieu solide (milieu sélectif a l'?uf de Loewenstein-
Jensen) et/ou liquide (apres la décontamination) 4 En combien de temps pensez-vous avoir les résultats de la culture ?
-15 jours - 1 mois (voire 2-3 mois pour mycobacterium africanum) 5 Le patient est hospitalisé, quelles vont être les précautions à prendre ?
-Chambre seule (+++) (voire chambre a pression négative)
-Port du masque ( pour les visiteurs, personnel soignant et le patient lui
même si il devait sortir de sa chambre) 6 Un traitement antituberculeux associant Isoniazide, Ethambutol et
Rifampicine est démarré, Expliquez pourquoi faut-il donner impérativement
une trithérapie ?
-Car il existe des mutants résistants préexistants vis-à-vis de chaque
antibiotique. Flore vaginale (sujet 1) Une femme de 22 ans consulte pour une douleur de la fosse iliaque gauche
d'apparition brutale, accompagnée d'une fièvre a 38,3 et de leucorrhée
jaunes abondantes. Sous contraception oestro-progestative, elle a des
rapports sexuels non protégés avec son nouveau partenaire depuis 15 jours. 1 quel mode d'infection suspecter en premier dans ce contexte ?
-IST ou MST l'examen vaginal à l'aide d'un spéculum montre une cervicite.
2 Citez deux bactéries responsables de cervicite et de salpingite :
-Neisseria Gonorrhoeae
-Chlamidia Trachomatis L'une est mise en évidence par biologie moléculaire sur un prélèvement
d'endocol ou d'urine (premier jet)
Laquelle ?
-Chlamidia Trachomatis L'autre est diagnostiquée par culture d'un prélèvement d'endocol sur gélose
« chocolat » incubée en atmosphère enrichie en CO2
Laquelle ?
-Neisseria Gonorrhoeae Quelles sont les caractères de cette bactérie ? ( neisseria )
-GRAM : cocci gram - ( diplocoque)
-Test de l'oxydase : positif
-Culture sur milieu de gélose chocolat sélectif contenant amphotéricine B ,
Vancomycine, Colistine : positive ( donne des colonies ) 3 Ces deux infections peuvent-elles êtres associées ?
-Oui 4 Quelle complication peut survenir en l'absence d'antibiothérapie
efficace ?
-Salpingite chronique ou une stérilité.
Flore vaginale (sujet 2)
Un homme de 30 ans, homosexuel, se découvre un matin une lésion sur le
fourreau de la verge, indolore, ovalaire, de 1 cm de long, sans
suppuration. Il consulte au bout de 8 jours. La palpation des aines révèle
des adénopathies inguinales dures et indolores.
Un examen de la sérosité est fait au microscope a fond noir entre lame et
lamelle. 1 Quelle bactérie est recherchée ?
-Treponema Pallidum (responsable de la syphilis) 2 Quels sont les caractères qui permettent d'identifier cette bactérie au
microscope ?
-spiralée, mobile Le résultat est négatif. Cette bactérie ne peut se développer in vitro.
3 Quels tests sérologiques sont pratiqués dans ces conditions
-TPHA , VDML 4 La sérologie est positive , Donner un exemple de Résultat (facultatif) :
8 unités au VDML
160eme au TPHA ... 5 Quel est l'antibiotique recommandé ?
Pénicilline G en intra-musculaire
(Pas d'inquiétude à avoir pour les questions 3 et 4 : la prof est une
petite Jokeuse... Ce n'est pas au programme et elle voulait juste «
connaître nos réminiscences de nos cours d'immuno ») Bon, c'est parti pour le cours à proprement parler :
1 ASSOCIATION D'ANTIBIOTIQUES
Une association d'antibiotiques, c'est quand on utilise deux antibiotiques
(par exemple A et B) de deux familles différentes ( la prof précise que
l'on associe jamais deux antibiotiques de la même famille car ça ne sert à
rien, mais ce n'est pas dangereux ) pour traiter un patient. Il peut y avoir plusieurs types d'interactions entre ces antibiotiques : 1 SYNERGIE : C'est-à-dire que l'action de A et B associés est supérieure a l'action de A
seul et B seul.
Par exemple : on prend 3 tubes de cultures ensemencés avec 10^6 bactéries.
Dans le tube 1, on met l'antibiotique A. Dans le tube 2, l'antibiotique B.
Et dans le tube 3, on met les deux antibiotique A et B.
Mise en culture 18 a 24 heures
Et l'on regarde le nombre de bactéries survivantes :
-Tube 1 (ATB A) il reste 1000 survivants =1000 UFC (Unité Formant une
colonie)
-Tube 2 (ATB B) il reste 100 survivants.
-Tube3 (ATB A et B) il ne reste que 10 survivants.
Donc il existe une synergie entre les antibiotiques A et B.
2 ANTAGONISME : C'est-à-dire que l'action de A et B associés est moins efficace que
l'action de A seul et B seul.
-Tube 3 (ATB A et à B) il reste 10000 survivants
Cette association n'est pas efficace, il ne faut donc pas donner au patient
des antibiotiques antagonistes.
3 INDIFERENCE : C'est-à-dire que l'action de A et B associés n'apporte rien de plus que A
seul ou B seul . 4 DANS QUEL CAS DONNER UNE ASSOCIATION D'ANTIBIOTIQUES ? : -Élargissement du spectre en cas d'infection mixte.(Et pas
d'antibiotiques commun pour traiter)
-Pour diminuer le risque d'émergence de résistance (ou pour lutter
contre les mutants résistants préexistants dans le cas de la tuberculose)
-Pour augmenter l'effet bactéricide dans les infections graves,
nécessitant un traitement prolongé :
exemples : - Endocardites ( B-lactamines-aminosides VS
streptocoques)
- Infections osseuses.
- Infection chez l'immunodéprimé ...
Pour utiliser l'effet de synergie surtout.
Exemple : endocardite à streptocoque ( enterocoque ++)
On utilise une association B-lactamine(ampicilline) + Aminoside.
Car la pénicilline inhibe la synthèse de la paroi et donc fais des trous
dans la paroi bactérienne et ainsi l'aminoside (qui inhibe la synthèse
protéique en agissant sur les ribosomes) qui ne peut normalement pas
pénétrer dans l'entérocoque ( car il lui manque une perméase) peut grâce
à l'action de la pénicilline pénétrer la paroi et agir sur les ribosomes
de l'entérocoque
=Action synergique : meilleur bactéricidie . 2 SPECTRES CLINIQUES
poly de Bactério page 69-70-71
Rappel :
Pour lire un antibiogramme on regarde les diamètres d'inhibition de
chaque antibiotique et on en déduit ainsi des concentrations critiques :
Diamètre = CMI (Concentration Minimale d'Inhibition)
CMI supérieure à la concentration critique de l'organisme (concentration
maximale d'antibiotique que l'organisme peut supporter) : RESISTANCE de
la bactérie.
CMI inférieure a la concentration critique de l'organisme : SENSIBILITE
de la bactérie.
CMI entre les deux (peu supérieure ou peu inférieure) : INTERMEDIAIRE
(peut être utilisé dans certaines conditions)
SPECTRE D'ACTIVITE :
Pour chaque antibiotique, on définit les germes habituellement sensibles.
Exemple : Ampicilline (B-lactamine) agit sur :
-Streptocoque
-Listeria
-E.coli (+/- car maintenant augmentation de la resistance)
Mais pas les staphylocoques (produisent une B-lactamase)
C'est le spectre d'activité de la molécule
- Le spectre est dit LARGE si la molécule peut agir sur un grand nombre
d'espèce
(Ex : CEFOTAXINE (céphalosporine 3eme génération) très large spectre)
- Le spectre est dit ETROIT si la molécule ne peut agir que sur un petit
nombre d'espèce (Ex : VANCOMYCINE n'agit que sur le streptocoque et les
staphylocoques, ou encore les MACROLIDES)
SPECTRE CLINIQUE D'UN ANTIBIOTIQUE : Se définit en fonction de :
- Pharmacocinétique
- CMI
- Spectre d'action naturel
- Résultats cliniques Ainsi pour un antibiotique on définit 4 classes de bactéries:
-Espèces habituellement sensibles (- de 10% de résistant)
-Espèces Modérément sensibles ou de sensi